红景天属植物根中红景天苷及其苷元酪醇含量的HPLC分析_图文

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第2 6卷 第 3期  20 0 6年 9月  

林 产 化 学 与 工 业              
Ch mity a d I d sr   fF r s  o u t  e sr  n  n u t o   o e tPr d cs y

Vo . 6 No 3 12   .  S p . 2 06 et 0  

红 景 天 属 植 物 根 中红 景 天 苷 及 其 苷 元 酪 醇  含 量 的 HP C 分 析  L
王 洋 ,于 涛 ,阎秀峰 
( 东北林业大 学 生命科 学学院,黑龙 江 哈 尔滨 104 ) 5 0 0 
摘 要 : 建 立 了一 种 采 用 K A H Q s  1 (5   m x .  m, m) 以 乙腈 一 溶 液 ( 积 比    Y   I iC 8柱 2 0m   4 6m 5 l   , 水 体

1 9 为 流 动 相 , 流 速 10mMm n 检 测 波 长 2 0n 进 样 量 l  L的 条件 下 , 高效 液 相 色谱 同 时  :) 在 .  l i、 8 m、 0 用
W ANG  n   Ya g

测 定 红 景 天 苷 及 其 苷 元 酪 醇 含 量 的 方 法 。 利 用 均 匀试 验 设 计 研 究 了分 析 样 品 的 制 备 方 法 , 定 了 确  

红景天根 粉的最佳提取条件为 : 以蒸馏 水为溶剂在 6 0℃ 下超声波提取 5 i。分别测 定 了不 同产  0m n

地 的 红 景 天 属 植 物 中红 景 天 苷 和 酪 醇 的 含 量 , 西藏 产 圣地 红 景 天 中 红 景 天 苷 含 量 最 高 , 到 2 17% , 次 为 藏 产 大 花  达 .4 其 红 景 天 和 西 藏 红 景 天 , 别 为 17 3% 和 12 1 ; 川产 大 花红 景 天 中酪 醇 含 量 最 高 , 0 2 85% , 次是 藏 产 西 藏  分 .6 .7 % 四 为 .9  其

红景天和大花 红景天 , 分别为 0 2 43% 和 0 136% ; .1  .8  长鞭红 景天和狭 叶红景天 中2种有效成分的含量均很 低 , 红景天 
苷 含 量仅 为 0 04% 和 0 o 3% , 醇 含 量 则 分 别 为 0 0 64% 和 00 48% 。 .3 .o 酪   l  .0   

关键 词 : 红 景 天 ; 景 天 苷 ; 醇 ; 声 波提 取   红 酪 超 中 图 分 类 号 :Q 1 Q 4 .3 R 8 .  T 9 ;9 6 8 ; 24 1 文 献标 识码 :  A 文 章 编 号 :2 3— 47 20 )3— 0 1 0  05 2 1 (0 6 0 05 — 4

De e mi a i n o   n e t  fS ld o i e a d T r s l tr n t   fCo tn s o   a i r sd   n   y o o  o

i   o il   os b   L   n Rh d o a Ro t  y HP C
W ANG  n Ya g,YU  o,YAN  u fn   Ta Xi —e g

( ol eo i c ne , o hat oet   nvri ,H ri 104 , h a  C l g f f Si csN r es F r r U ie t e Le e t   sy sy a n 500 C i ) b  n
Ab t a t   to   r h   ee mi ain o  o t n so a ir sd   n  yo o i  h do a b   L   se tb ih d h   L   s r c :A meh d f   e d tr n t   f n e t fs d o i e a d tr s l n R o il   yHP C wa  sa l e .T e HP C ot o c   l   s

sp ao  a r o e naK A H Q s  1 o m 2 0m × .  5 m) a f wrt lmMmn wt m bl p ae e a t nw s e r do   Y   I iC 8cl n(5   m 4 6mm,  r i p fm l u , t o   e   l i, i  oi h     l a  h e s
o ctn re w t 1 9 n  e ce t ae nt 2 0n U i  nf  ei ,h pi a cnio s r ai oi  n  f eoii / a r( : )a ddt t a w vl gh 8 m. s gu ir d s n te t l odt n    d s ead a tl e e d   e   n o m g o m   i f s r d o l
tr s le ta t n w r   x lr d t  e u t s n c l  xr ce   y d si e   ae   t6 ℃ fr5   n C n e t o   air sd   n   y o o  xr ci   e e e p oe  o b   l a o ia y e t td b   it l d w tr a 0 o r l a l   o   0 mi . o t ns fs d o i e a d   l
tr s li  h d oa ro s w r  ee ie .S ir sd   o t n  a    1 7% ,t e h g e ti   h s cc fo   i e .t e  n Rh  y o o n R o il  o t  e e d tr n d a d o ie c n e tw s2 4 m l h   ih s n R   a r  r m T b t h n i   . t
ce l a a d Rh. tb tc  r m  b t 1 7 3 % a d 1 rnuat  n   ieia fo Tie , . 6 n   271% ,r s c iey;t r s lc n e twa   2985 % ,h   i h s n Rh  e pe tv l y o o  o t n  s0.   t e h g e ti  .

ce ua a f m  ih a rn l t  o Sc u n,t e   n R .t ei   n   .ce u a a fo T b t . 1   r h n i  h i t a a d Rh rn l t  r m  i e ,0 2 4 3% a d 0 1 3 6% ,r s e t ey b c n  .8  e p c i l ;w ee   v h ra s

bt cn nsw r vr O nR .fsgaaa dR .k i w  o  iha  i  a doiecn nso ol 0 0 4% ad o  ot t ee e l i h at i  n   h il if m Scu wt sl rs  ot t f ny .3 h e     y W   i t ro r n h 【 i d e      n 
0. o3 % .a  y o o  o tn s o o nd tr s lc ne t  f0. 64 % a d 0. 0 8% .e p cie y  01 n   0 4  r s tv l . e

Ke   r s h do a;a ir sd tr s l u t s n c e t c in y wo d :R o i l s l o ie; o o ; l a o i  xr t   d y r a o

景天科红景天属 ( hd l) R oia 植物全球约有 9 o 0余种 , 主要分布于北半球高寒地带 , 国红景天属植  我 物有 7 余种…。红景天具有很高的药用价值 , 0 其免疫作用强于人参和刺五加而无人参的过度兴奋和刺 
五加 的致便 秘作 用 , 有抗 疲劳 、 衰老 、 缺 氧 、 辐射 、 奋智 力 之 功效 , 具 抗 抗 抗 兴 可治 疗 多种 疾 病 , 巨 大 的  有 经济价 值 和广 阔的 开发 前 景  J 。红 景天 的 主要 药 用 活 性 成 分 是 红 景 天 苷 ( 。 加   及 其 苷 元 酪 醇  C  O ) H ( 8 o 2 [ 。其 中 , 山红 景天 ( hscaies ) 玫瑰 红景 天 ( h rs ) C Hl )2 O   J 高 R .ahl ni 、 n s R .oe 和西 藏 红 景天 ( h tec ) a R .i ta  bi
是 人们 关注较 多 的红景 天属植 物 。  

收 稿 日期 :0 5一 一l 20 叭 1  

基金项 目: 国家 自然科学基金 资助项 目(9 0 03   3 70 1 ) 作者简介 : 洋(9 1一) 女 , 王 17 , 黑龙江哈尔滨人 , 副教授 , 博士, 研究方 向为植物次生代谢生态学 、 物化学  植 ·通讯作者 : 阎秀峰 , 教授 , 博士生导师, 主要从事植物生理生态 学研究 。  

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5  2













业 

第2   6卷

超声 波是一种 弹性 波 , 它能产 生并 传递强大 的能量 , 并进 而形成空化作 用 , 使植物细 胞破 裂[ ]   。超声 

波 提取法是将超 声波作用 于提取 液体 系以获得待分析样 品 的技术方 法 。 与常规 提取 法相 比, 。  , 具有提 取时  间短 、 产率高 、 简单等优点 _ 。近年来 利用 高效 液相 色谱 法测定 红 景天 苷含 量 的方法 很 多  “ , 同  操作 8 ] ]但
时鉴定样 品中 2种主要有效成 分红景天苷及 酪醇却 少有报 道  l  。以往 研究采 用 的传统提 取方 法 , 取时  提 间长且不易将 红景天苷提取完 全 。本研 究探讨 了超声 波提取 红 景天 根 中红 景 天苷 和酪 醇 的方 法 , 对结  并

果 进行综合分 析 , 以期确定最佳 条件 , 使红景 天苷及酪醇含 量分析更简便 、 快速及可靠 。  

1 材 料 与 方 法 
1 1 材 料 与仪器  .

原 料 : 山红 景 天根 , 自吉林省 长 白山 ; 同产 地 的红景 天根 的样 品 , 高 采 不 由大兴 安岭 红景 天药 材开发  应 用研 究所 提供 。仪 器 : ts高 效 液相 色谱 仪 (4 7型 紫 外 检 测 器 ) Boue2 R高 速 冷 冻 离 心 机  Wa r e 28 ; i g 2 f
( 国 H re s e a c 司 ) A 14型 电子 天平 ( 士 ) Mu i mp 德 eau  pt h公 s e ;B 0 瑞 ; lt m型恒 温 循 环水 浴 ( h r a i Bo  te P am c   i. a

tc 司 ) K 一 0 D eh公 ; Q 10 B超声 波仪 ( 江苏 昆 山超声 仪器 公 司 ) 。试 剂 : 乙腈 为 色谱 纯 , 为超 纯 水 , 它试  水 其 剂均 为分析 纯 , 景 天苷购 于 中国生物 制 品和药 品检定 所 , 红 酪醇 由香 港科技 大 学提供 。  
1 2 色谱 条件  .

色谱柱 K AHI iC 8柱 ( .  × 5e 5 Y   Q s  1 l 46mm 2 m, m) 检 测 波 长 2 0n 流 动 相 : ; 8 m; 乙腈 一 ( 积 比  水 体
19 ; : ) 流速 1 L mi;   / n 进样 量 1  L  m O 。 1 3 标 准 溶液 的配 制  .

精 密称 取红 景天 苷标准 品 5m , 1    g于 0mL容量 瓶 中以 乙腈 一 为 溶剂 , 声 波 溶解 并 定 容 , 匀 备  水 超 摇 用 。精 密称 取酪 醇标 准 品 5m , 1  L容量 瓶 中 以乙腈 一 为溶 剂 , 声波溶 解并 定容 ,   g于 0m 水 超 摇匀 备 用 。  
1 4 标 准 曲线 的绘制  .

分 别精 密吸取 红 景天苷 及酪 醇 标 准 溶 液 0 2 、 . 0 10 15 、 .0mL于 5mL容 量 瓶 中 , . 5 0 5 、 .0、 . 0 2 0     以乙  腈 一 为溶剂 定容 , 匀 。按 照选定 的色 谱条件 , 别对 不 同浓度 的标 准溶液 进样 分 析 , 水 摇 分 每样 重 复测 定 3   次 。分 别 以质量 浓度 ( g mL 红景 天苷 口 、 醇 口 ) m/ , 。酪 : 为横 坐标 , 面积值 ( ) 峰 b 为纵 坐标 进行 回归计 算 , 得  红 景 天苷和 酪醇 的 回归方程 和相 关系 数分别 为 :  
b l=2 0 9 8 5 1 8 3   1   4 . 1   al-84 9 7   R =O. 9     0 . 917, 9 99;b 2=6 2 4 8 4. 0   a   2   7 6 2 2 2—5   9 7 8 3, =O. 9     5 7 0.0   R 9 99

1 5 样 品 制备  .

影 响植 物 中有 效成 分提 取 的因素很 多 , 研究 选择 了 乙醇体 积分数 、 本 提取 温度 和提 取时 间进行 3因  素 1 水 平 的均匀设 计试 验 ( 表 1 ,   1 见 ) 以红景 天苷 和 酪醇 的提取 率 为 评 价指 标 , 探讨 了超 声 波提 取 红 景 
天根 中 2种有 效成 分 的最佳 条件 。   精 密称 取红 景 天根 粉 2g于 5   L容 量瓶 , 照    0m 按

设 计 的实验 条件 , 入 4  L一定体 积 分数 的乙 醇溶  加 5m
液 在不 同 的时间及 温 度 条 件 下超 声 波 提取 红 景 天 苷 

和酪醇后 , 却至 室 温 , 用相 应 体 积 分 数 的 乙醇 溶  冷 再
液 定容 至刻 度 , 摇匀 。吸取 1m   L上清 液至离 心管 中 ,   离 心 ( 200rm n 5mi , 用 。 1 0   i )  n 备 /  

2 结 果 与 分 析 
2 1 色谱 分析  .

4  

8  

l  l  2 6

2  O

5  

l  0

l  5

2  O

25  

保 留 时 I/ n ' mi   ̄

保 留时 间/ n mi 

1红 景 天 苷 sl r s e 2 酪 醇trsl . ai oi ; . d d yoo 

标准 品及样 品色谱 图见 图 1  。 2 2 红景 天苷 及酪 醇超声 波提 取 实验 条件 的确定  . 

图 1 标 准 品 ( ) 样 品 ( ) 色谱 图  a和 b的
Fg 1 C rmao mso tn ad smpe( )a d smpe i.  ho t ̄a  fsa d r a l a n   a l   o R o il b  f h doa( )

均匀设 计 试 验 结 果 见 表 1 。分别 以 乙 醇 体 积 分 
数 ( ) 提取 温度 ( ) 提取 时 间 ( ) 自变 量 ,   、  : 、  , 为 以 

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第 3期 

王 洋 , : 景 天属 植 物 根 中 红 景 天 苷 及 其 苷 元 酪 醇 含 量 的 H L 等 红 P C分 析 

5  3

红景 天 苷得率 (, 、 1) 酪醇 得率 ( 2为 因变量 , 均匀设 计 软件 ( . , y) 用 2 0版 ) 对试 验 结 果进 行 逐步 回归分 析 ,  
得 如下 回归方 程 :   Y = .6  0 — .0 6   l 002 6  + .0 6 X — .0 1 7 + l 067 2  00265 X + .1  3   001 8 3 00000 冒   6 5 0 0 9 7 6  

0000 1 X 一 .0  5 雹 一 .0 1 5 .0 1 1 l 0000       9 0 000 9   0 


一 .0  88 000 0 霹  0

0. 05185   —0 0   38 X l+0. 00 65       71 .0 0 2  1 0   55

+0 0   03 9 .0 0 2   X3—0. 00 00   x + 0   0i  

0000 1 X X + .0 0 X X — .0 0 X 一 .0 0 XX — . 000 X .0    l2 000001 l3 00003 ; 000023 2 3 00  0    09 9 0 4

进 行各 因素对 红景 天苷 提取 率影 响 的逐步 回归 模 型分析 表 明 , 着溶剂 中乙醇体 积 分数 的提 高 , 随 红 
景 天苷 的溶 出逐 渐减少 , 因此 , 含 乙醇 的蒸馏 水为 红景 天苷 的最 佳提 取溶 剂 。红景 天苷 的提 取率 随提  不

取 温度 的提 高而增 加 , 当提取 温度 高于 4 但 O℃ 以上时 , 随提 取温 度 的提 高 红景 天 苷提 取 率增 加 的趋 势 
减弱 , 最佳提 取 温度 为 6 O℃ 。红 景天 苷 的提取率 随 提取 时间增 加基 本 呈 降低 的 趋势 , 取 时 间为 2   提 O~ 6   n时红景 天苷 的提 取率 基本 保持稳 定 , 0mi 根据 回归方程计 算 最佳提 取 时间 为 3 .  i。 4 gm n 
表 1 u 1  均 匀设 计 试 验 条 件 及 分析 结 果     ( l )
T be1 E p r et odt nadrslo u i r ds n al   x e m n cn io n   ut f n o   i   i e     f m ei   g (    1 1  )

进 行各 因素对酪 醇提 取率影 响 的逐步 回归模 型 分析表 明 , 乙醇体 积分 数对 酪醇 提取 率 的影响 最大 ,   而提 取温度 及提 取 时 间 的影 响很 小 。根 据 回归方 程 计 算 , 馏 水 是 最 佳 提 取 溶 剂 , 佳 提 取 温 度 为  蒸 最

5 .6℃ , 39 最佳 提取 时间 为 9 .4mn 26  i。对各试 验 条 件 进 行综 合 分 析 , 定 了红 景 天苷 及 酪 醇 的最 佳 提  确
取条 件为 6 O℃ 下 , 蒸馏 水超 声波提 取 5   i。 0m n 
2 3 精密 度实验  .

精密称 取 5份红景 天根 粉末 于 5   L容量 瓶 中 , 0m 每份 2g 以 4    , 5mL蒸馏 水 为 提 取溶 剂 ,O℃ 下超  6

声波 提取 5  i, 0mn 冷却后 蒸馏 水稀 释 至刻度 , 1m 取   L离心后 在选 定 的色 谱 条 件下 测 定 红 景天 苷 及 酪醇 
含量 , 测得 红景 天苷 和酪醇 峰 面积 的相对标 准偏 差 ( S ) R D 分别 为 2 4 .7% 和 3 6 .2% 。  
2 4 回收 率实验  .

精密称 取 3份高 山红 景天根 粉末 , 份 1 , 别加 入红 景天 苷标 准品 1  g及酪 醇标 准品 1m , 每   分 g 0m   g按  样 品 制备及 测定 方法进 行定 量分 析 , 测得 红景 天苷加 样 回收率 和 R D分别 为 9 .5% 和 3 2 % , S 42 . 1 酪醇 
的为 9 .4% 和 3 7 76 .5% 。  
2 5 样 品测 定  .

采 用 以上方 法分析 了不 同产 地红 景天 属植 物根 中的红 景 天 苷 和酪 醇 含量 ( 见表 2 。结 果 表 明 , ) 西 

藏 产圣 地红 景天 中红景 天 苷含量 最高 , 次为 藏产 大花红 景 天和西藏 红 景天 ; 其 四川 产大 花红 景天 中酪醇  含 量最 高 , 次是 藏产 西藏 红景 天和 大花 红景 天 ; 鞭红景 天 和狭 叶红景 天 中两种 有效 成分 的含 量均很  其 长
低 。不 同产 地 的同种红 景 天 中有 效成 分 的含量也 存 在 差异 。高 山红景 天 中 , 白山产 的红景 天 苷 含量  长

均 较高 , 而加 格达 奇所 产 的红景 天酪醇 含量 则相 对 较高 。大 花 红景 天 中 , 四川产 的酪 醇 含量 较 高 , 而西 
藏产 的则红 景 天苷含 量较 高 。  

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业 

第2 6卷 

表 2 不 同 产 地 红 景 天 属 植 物 根 中红 景天 苷 和 酪醇 含量  
Ta l    Sai o i   n  y o o  o tnt n Rh dil  o t r m  fe e tp o e a c s be2 l dr sde a d tr s lc ne s i  o oa r os fo difr n  r v n n e  

3 结 论   
3 1 建 立 了一种 简便 、 . 快速 测定 红景 天根 中红景 天苷 及其 苷元 酪醇 的高 效液相 色谱 分析 方法 。  
3 2 运 用均 匀设计 法考 查 了从红 景天 根 中超声 波提取 红景 天 苷和酪 醇 的试验 条件 , 到 同时提取 红景  . 得

天 中 2种有效 成分 的最 佳工 艺条 件 : 以蒸馏 水为 提取 溶剂 , 红景 天根 粉在 6 =下超 声 波提取 5  n  0c I 0mi。
3 3 测 定 了不 同产 地 的红景 天属 植物 中红 景天苷 和 酪醇 的含量 , . 西藏 产圣 地红 景天 中红 景天 苷含 量最 

高 , 到 2 17% , 次 为藏产 大花 红景 天 和西藏 红景 天 , 别为 173%和 12 1 ; 达 .4 其 分 .6 .7 % 四川 产大 花 红景  天 中酪 醇 含 量 最 高 , 02 8 为 .9  , 次 是 藏 产 西 藏 红 景 天 和 大 花 红 景 天 , 别 为 0 243% 和  5% 其 分 .1  0 136% ; .8  长鞭 红景 天 和狭 叶红 景 天 中 2种 有 效 成 分 的 含量 均很 低 , 景 天 苷 含 量 仅 为 00 4% 和  红 .3
0 O 3% , 醇含量 分别 为 0 0 6 .0 酪 . 1  4% 和 0 O 48% 。 .O    
参考文献 :  
[] 1 包文芳 , 吴维春 , 李葆华.抗疲劳药用植物红景天[ .北京 : M] 人民军医出版社 , 0 4  20 . [] 2 明海泉 , 夏光成 , 张瑞均.红景天研究进展[ ] J .中草药 ,18 ,9 5 :7 4 . 981( )3_ 1   [ ] 秀.红景天属植物 的药用价值[ ] 3张 J .中国野生植物 资源,19 ( )3 — 5 9 3 1 :3 3 .   [] 4 许建峰 , 应佩青 , 苏志国.高 山红景天资源应用与开发研究进展 [ ] J .中草药 ,19 , 9 3 : 0 — 0 . 9 8 2 ( ) 2 2 2 5  [] 波 , 5孙 彭密军 , 晓燕.超声波提取杜仲叶的工艺研究 [ ] 杨 J .林产化学与工业 ,19 1 ( )6 — O 99,9 3 :7 7 .   [] 6 王振宇 , 鑫.超声波提取大花葵色素的工艺研究 [ ] 赵 J .林产化学与工业 , 0 32 ( )6 — 7  20 ,3 2 :5 6 . [] 7 阎秀峰 , 洋 , 涛 , 喜树叶中喜树碱含量 的高效液相色谱分析[ ] 分析测试学报 , 02,1 2 :5 1. 王 于 等. J. 20 2 ( ) 1 — 8   [] 8 秦彦杰 , 张玉红 , 洋 , 王 等.黄檗中生物碱含量 的高效液相色谱 分析[ ] J .林产化学与工业 , 0 4,4 增刊) 15 18  20 2 ( : 1— 1. [] 燕 , 9周 孙启生 ,刘 伟.反向高效液相色谱法测定红景天 口服液中红景天苷 的含量 [ ] J .中草药 ,19 , 4 9) 4 2 4 3  93 2 ( : 7—7. [ O 阎秀峰 ,王 洋 , 意 , 1] 杨 等.大海林地 区不 同生境高山红景天根部红景天苷含量 的差异 [] J .植物研究 , 00, 0 2) 13 19 20 2 ( : 7 — 7  [ 1王 洋 , 涛 , 1] 于 王化 田, 等.高效液相色谱法测定红景 天苷含量方法 的研究 [ ] J .植物研究 , 0 12 ( ) 13 15  20 ,1 1 :1— 1 . [ 2 彭江南 , 浩 , 1] 陈 马成禹.高效 液相色谱测定红景天中红景天苷和酪醇 的含量 [ ] J .药物分析杂志 ,19 ,1 ( : 1 2 . 9 5 5 4) 2 — 3 


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