CIK治疗后肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞变化研究_图文

!""# 年第 #" 卷第 $ 期

中国肿瘤临床

? HTK ?

!"# 治疗后肿瘤患者外周血 $ 淋巴细胞亚群 和 %# 细胞变化研究 D
段秀梅 谭 岩 方艳秋 许淑芬 ( 长春市 熊 伟

吉林大学第一医院中心实验室

K#""!K)

摘要

探讨 >?@ ( 治疗后肿瘤患者的免疫功能状态。方法: 采用流式细胞术 检 测 !" 目的: >,33 ?(<&82*4( @*33,:)

例肿瘤患者外周血 - 淋巴细胞亚群和 C@ 细胞。 肿瘤患者 >%#G、 结果: >%HG、 >%#I J >%KLGMLG细胞和 >%H J >%N 比值明 。>?@ 生物治疗后 >%#G、 显低于对照组并呈显著性差异, 而 >%NG细胞高于对照组( <O"A"K ) >%HG、 >%#I J >%KLGMLG细胞 和 >%H J >%N 比值都升高, 其中 >%HG、 , 而 >%NG细胞与治疗 >%#I J >%KLGMLG细胞与治疗前比较呈显著性差异( <O"A"M ) 前比较降低( 。结论: 肿瘤患者的免疫功能低下, <O"A"M ) >?@ 生物治疗能够提高机体的免疫功能。流式细胞术对患者 免疫功能的监测, 具有快速、 灵敏、 准确的特点, 对于评价疗效、 判断预后具有重要价值。 关键词 流式细胞术 肿瘤

- 细胞亚群

C@ 细胞

免疫功能

中图分类号: R$#"AMK

文献标识码: S

文章编码: K"""INK$T ( !""# ) "$I"HTKI"#

!"#$% &’ ()*’+, &- . (,// !#01,"1 *’$ 23 (,//1 4’ 5,647),6*/ 8/&&$ -6&9 5*"4,’"1 :4") .#9&6 .6,*",$ :4") (;3
%&’( )*&+,* -’( .’( /’(0 .’(1*& ,2 ’3 !"#$%&’ (&)*%&$*%+ *, -*./ 0*123$&’4 53’3# 6#37"%13$+4 !8&#9:8;# <01"6*=" >0?,="4@,A -4 *(5,62*0’2, 27, *++&(4340*8’3 9&(82*4( 49 2&+4: ;’2*,(26 2:,’2,< =*27 >?@A B,")&$1A -7, - 8,33 6&B6,26 ’(< C@ 8,336 *( ;,:*;7,:’3 B344< 9:4+ ;’2*,(26 =*27 2&D +4: ( # E!") =,:, <,2,82,< =*27 934= 8F24+,2:FA C,1#/"1A -7, >%# G 、 >%H G 、 >%# I J >%KLGML G 8,336 ’(< >%H J >%N 9:4+ ;’2*,(26 =*27 2&+4: ’:, 6*0(*9*8’(23F 34=,: 27’( 27’2 49 27, 84(2:43 ( <O"A"K) A G >4+;’:*,< =*27 27, 84(2:43 0:4&;P 27, >%N 8,336 9:4+ ;’2*,(26 =*27 2&+4: =,:, *(8:,’6,< ( <O"A"K) A G G I G -7, >%# 、 >%H 、 >%# J >%KL GML 8,336 ’(< >%H J >%N 9:4+ ;’2*,(26 2:,’2,< =*27 >?@ =,:, *(D 8:,’6,<A >4+;’:*,< =*27 ;:,I2:,’2+,(2P 27, <*99,:,(8, 49 >%HG、 >%#I J >%KLGMLG 8,336 *6 6*0(*9*8’(2 ( <O"A"M) ’(< 27, >%NG 8,336 =,:, <,8:,’6,< ( <O"A"M) A (&’=/#14&’1A -7, *++&(4340*8’3 9&(82*4( 49 ;’2*,(26 =*27 2&+4: =,:, <,8:,’6,< ’(< 84&3< B, ,(7’(8,< BF >?@ B*427,:’;FA -7, 934= 8F24+,D 2:F *6 ’ :’;*< 、 6,(6*2*5, ’(< ’88&:’2, +,274< 24 <,2,82 27, *++&(4340*8’3 9&(82*4( 49 ;’2*,(26 =*27 2&+4:A ?2 8’( ;3’F ’( *+;4:2’(2 :43, 24 5’3&, 8&:’2*5, ,99,82 ’(< Q&<0, ;:40(46*6 49 27, <*6,’6,6A 3,% :&6$1 /34= 8F24+,2:F -&+4: - 8,33 6&B6,2 C@ 8,33 ?++&(4340*8’3 9&(82*4(
肿瘤免疫学研究表明,肿瘤患者的细胞免疫与 肿瘤的发生、 发展密切相关。 - 细胞亚群是构成机体 免疫防御的重要因素。 - 淋巴细胞有两个主要亚群, 即辅助性 - 细胞 ( -7) >%H G 和 抑 制 性 - 细 胞 ( -6)

D

本文课题受卫生部部属医疗机构临床学科重点项目( 编号: , 吉林省卫生厅医学科研基金( 编号: , TLIT"LI"KI!# ) "!" ) 长春市科委发展科技计划项目基金资助( 编号: "KI"$NU"! )

? +3! ?

中国肿瘤临床

!""# 年第 #" 卷第 $ 期

(),*。机体内的免疫平衡主要由这两类细胞相互间 影响来维持。 ()+*% 细胞具有调节免疫反应的活性,
辅助 7细胞产生抗体, 分泌细胞因子的作用, 而 (), 则有免疫抑制和细胞毒性作用 。 ()+ 下降或 (),
8/9

的 鼠 抗 人 单 克 隆 抗 体 , 包 括 ()# - ()+ 、 ()# - (),、 同型阴性对照) , 购自深圳 ()# - ()/0*10、 :GH/ - :GH/( 达科为生物技术有限公司。 (:’ 细胞由我院生物治 疗中心提供。

升高均可使两者比例失调, 导致机体免疫功能缺陷。 国内外很多研究结果指出, 多种肿瘤患者有 % 细胞 亚群状态异常和比例失调,其 ()+ - (), 比值的降
#9 低与病变程度相关8!, 。&’( 细胞可 ()#. - ()/0*10*)

/2#

方法

取肝素抗凝血 /""!@ , 分别加 <(I 标本的制备: 入荧光标记抗体 /"!@, 振荡混匀后避光 !"JAK, 加入 振荡混匀, 溶 血 /"JAK , 离 心 /"JAK , 用 !J@ 溶 血 素 ,

以杀伤感染了病原体的自身细胞和肿瘤细胞,是天 然免疫的重要组成部分
8+, 19

"2/JL@ - M NO $2" E7> 洗涤 ! 遍,再加入 1""!@ 的 E7> 混 匀 , /"JAK 后 上 机 检 测 。 <(I 检 测 : 利 用 激 (FMMPCQRS 功能软件进行双参数获得数 据 分 析 , 光 光 源 /1JT 氩 离 子 激 光 , 波 长 +,,KJ, 先用标准 荧光微球对仪器作校对,使半峰变异系数在 !U 之 内。 以前向角散射光对 3" 度角散射点图确定淋巴细 胞群, 用门圈出拟测细胞, 计数 /" """ 个细胞, 每个
标本用同型抗体作自身阴性对照,设立荧光染色阴 阳分界线, 然后检测 ()# 、 ()+、 (),、 ()/0*10 阳性 表达率。

。本文利用流式细胞仪检

测了 !" 例不同肿瘤患者 % 淋巴细胞亚群和 &’ 细 胞,分析肿瘤的发生与 % 淋巴细胞及 &’ 细胞的关 系, 同时观察经 (:’ 生物治疗后患者的免疫功能状 态, 这对病情判断和治疗评价具有指导价值。

! 材料与方法 /2/ 检查对象
肿瘤 经临床确诊为中晚期肿瘤的患者 !" 例 ( 组) , 其中原发性肝癌 /! 例, 食管癌 1 例, 结直肠癌 女 $ 例; 年龄 +";$0 岁, 平均年龄 10 # 例。男 /# 例, 岁。 每个疗程 /" 天, 分别在 (:’ 生物治疗 # 个疗程, /"、 !"、 #" 天后采血检测。随机选择体检健康成年人 对照组) , 男 /" 例 , 女 /" 例 ; 年龄 !" 例 作 为 对 照 ( 平均年龄 1! 岁。 ++;0" 岁, /2! 仪器和主要试剂 流式细胞仪 <=(> (?@ABCD , 美国 7) 公司产品。 本研究使 用 的 双 色 荧 光 抗 体 均 是 <:%( 和 EF 标 记
表!
组别 对照组 肿瘤组 治疗前 治疗后 /" 天 例数

/2+

统计学方法 所有数据均以平均数和标准差 !"# 表示,各组

之间的数值比较采用两样本均数 % 检验。

% 结果 !2/ 两组比较 表 / 所 示 , 肿 瘤 组 ()#、 ()+ 下 降 , (), 升 高 ( 。 呈 $6"2"/) ()+ - (), 比值和 &’ 细胞数明显下降, 显著性差异( 。 $6"2"1)
( !"# )
&’ (),
*

肿瘤组治疗前后与对照组外周血 " 细胞亚群和 #$ 细胞测定
% 细胞亚群

()# !" !"

*

()+

*

()+ - (), /2+!4"2+/

*

*

()# - ()/0*10* /+23/4+2,$ //2/$4021,5 /!2"#402$" /!21/402+/ /+2,$4$2#1!!

.

0123,432"1 1,21"4,2/+55 1,2$/4$2"0 0"2#3402## 0/2#0402+/

+"2!14$2$/ #!2,34,2"055 ##2+,4,21, #12314$2!/ #$2"#4$20!
!

!12",402#0 !32/04$2/+55 !32/$402#3 !0231402"# !02"+4+21#
!

/2"#4"2!+5 /2"04"2#/ /2/$4"2!! /2!!4"2+,

!" 天 #" 天

!! 注: 与对照组比较, 与治疗前比较 !$6"2"1 , 5$6"2"1 , 55$6"2"/ ; $6"2"/

!2!

肿瘤组患者治疗前后比较 表 / 所 示 , 经 (:’ 治 疗 /" 天 后 ()#、 (),、

而 ()+ 和 &’ 细胞数略有 ()+ - (), 比值均无改变; 升高, 但无统计学意义。经 (:’ 治疗 !" 天后 ()#、 ()+、 ()+ - (), 和 &’ 都 升 高 , 但 无 显 著 性 差 别 ; (), 略有降低。而经 (:’ 治疗 #" 天后, ()# 有升高 趋势,但无统计学意义, ()+ 升 高 (), 降 低 ( $6

。 但无显著性差异。 "2"1) ()+ - (), 比值升高, &’ 细 胞数显著升高( 。 $6"2"1) & 讨论 机体的抗肿瘤免疫作用是依靠机体的免疫监视 作用来完成的, 而细胞免疫被认为是主要作用。 人体 细胞与 %W - %R ( 细胞是细胞 % 细胞的 %V ( ()+*) (),*) 免疫系统中两大最基本的组成部分,其细胞量及比

!""# 年第 #" 卷第 $ 期

(0. 治疗后肿瘤患者外周血 6 淋巴细胞亚群和 -. 细胞变化研究
参考文献
! (

? +/# ?

例反映了机体的细胞免疫总体情况,在调节细胞免 疫, 维持免疫系统的平衡稳定中起重要作用
%&, $’

。文

陈慰峰 " 主编 # 医学免疫学 $%&# 北京 ’人民卫生出版社 "())(#*+,*-

献认为, 肿瘤形成发展过程中, 产生或分泌可溶性免 疫抑制因子,可诱导 ()* 的产生同时阻止 ()+ 的 形成和成熟而导致 ()+ , ()* 比值下降以 及 -. 细
/’ 胞减少%*, 。 本组资料显示, 肿瘤患者 ()+ 显著下降,

./01 23" 451 .%" 46 47" 08 9:# ;0<0=50> 3?+ @ 3?A =98B65 6C 81D6=EBFCB:8=98BFG :HDI/6JH805 9=0 J6==0:980> KB8/ 8/0 I=6L G=055B6F 6C /1D9F J0=<BJ9: J9=JBF6D9$M&# 39FJ0=" !***" A-NAO’ !PQR,!P+Q

Q

;6SBF56F T" .0G9: ;" .8=1DBFG0= U" 08 9:# UHDI/6JH80 .1SL I6I1:::98B6F5 BF V98B0F85 KB8/ %1:8BI:0 V=BD9=H W1D6= $M&# 39FJ0=" !***" APN*O’ ()RQ,()R-

()* 升高, ()+ , ()* 比值下降。即表明肿瘤患者机
体细胞免疫功能低下和平衡失调与肿瘤相关,可能 是免疫抑制因子发挥作用的表现。 资料还显示, 应用
+

W9X086DB Y" ./BD9>9 %" ./B=9S0 Z" 08 9:# 7981=9: ZB::0= 30:: YJ8B<B8H BF V98B0F85 KB8/ 40I986J0::1:9= 39=JBF6D9$M&# !**A" AQN!O’ PA,-Q 39FJ0="

(0. 细胞进行生物治疗 #" 天后,其中 ()#、 ()+ 都 有升高趋势, 。 说明生物 ()+ 呈显著性差异( !1"2"3) 治疗 #" 天能增强机体的细胞免疫功能, 这与文献报
道一致 %4"’。尽管细胞免疫抑制状态得到了最大程度 地解除, 免疫功能逐步得到改善, 机体处于一种活跃 的免疫状态中, 但患者的免疫状态仍然低下。 研究表明, -. 细 胞 是 细 胞 毒 细 胞 群 中 的 主 要 细胞之一,它能杀死自体肿瘤细胞和主要组织相容 复合体不相容的移植细胞,并且它的这种作用不需 抗原的预刺激或细胞因子的激活,从而成为人体天
4!’ 然免疫系统的重要组成之一%44, 。本研究结果显示,

P -

2=B880F>0F M" 40H5 .?" ;655 M" 08 9:# 7981=9: ZB::0= 30:: 9F> 39FJ0=$M&# 39FJ0=" !**-" RRNRO’ !((-,!(+Q 49HFB0 [?" ./0F WW" [=9G61>95 T." 08 9:# \:6K JH86D08=H 9F9:H5B5 6C I0=BI/0=9: S:66> :HDI/6JH805 BF I98B0F85 KB8/ J/6=6B>9: D0:9F6D9$M&# YD M ]I/8/9:D6:" !**R" !(+NQO’ QPR, Q-!

R A

王彦威 " 姜如同 " 杨茂林 " 等 # 肝癌患者脾脏免疫状态的 研 究 $M&# 中 国 肿瘤临床 "!**R"(+N!)O’RP!,RPP

40=FS0=G ^" %1/6F0F W" W1=1F0F MV" 08 9:# W/0 3?+ @ 3?A =98B6 95 9 I=6GF658BJ C9J86= BF I98B0F85 KB8/ D0895898BJ D0:9F6D9 =0J0B<BFG J/0D6BDD1F68/0=9IH$M&# M 6C 3:BFBJ9: ]FL J6:6GH" !**-" !+NPO’ !-*),!-*-

治疗前肿瘤组比健康对照组的 -. 细胞明显降低。 可能由于肿瘤浸润致使 -. 细胞的数量及反应性均 受到损害, 并使患者对肿瘤细胞的清除能力下降, 使 肿瘤得以形成。而经生物治疗后, -. 细胞的相对比 例为 4+2*$5 ,比治疗前 4424$5 有明显的增高。同 时,我们还观察到 -. 细胞反应性增强者的临床症 状要明显优于 -. 细胞反应下降或不变的患者。因 此进一步的研究 -. 细胞在肿瘤治疗中的反应变化 及 6 淋巴细胞的量和活性将成为新的课题。 多年来, 对肿瘤的诊断, 恶性度及预后的判断主 要依据病理学检查,缺乏定量性,并受主观因素影 响。 随着流式细胞仪不断改进和发展, 其应用也日益 广泛, 由于其精确、 快速、 灵敏等优点, 并同时具有定 性和定量分析的能力, 所以, 它正在越来越多的研究 领域和学科中代替了传统方法,并显示出巨大的发 展潜力。

*

[0=9:> 3# ]_5B::B<9F"YFF0 ;" 08 9:# ;0GB6F9: ‘DD1F651II=05L 5B6F BF T56I/9G09: .a19D615 39FJ0=$M&# M ‘DD1F6:" !**-" !PR N!)O’ +R!R,+R()

!) .J/DB>8E^6:C [4" 70G=BF ;." ZB0D 4V" 08 9:# b50 6C .3‘? D6150 @ /1D9F :HDI/6D9 D6>0: 86 0<9:1980 JH86XBF0 BF>1J0> XB::0= J0::5 KB8/ I680F8 9F8BE81D6= J0:: 9J8B<B8H$M&# M TcI %0>" !**!" !R+N!O’ !Q*,!+* !! .0XB ." 49S1 d" Z9K9D1=9 W" 08 9:# W/0 UB<0= 95 9 3=1JB9: ]=G9F BF 8/0 \B=58 UBF0 6C 4658 ?0C0F50’ 8/0 ;6:05 6C Z1ICL C0= 30::5" !R+’ QP,+!( %9=X M." Z0<BF d;W" ./9HF9 TY." 08 9:# ?0CC0=0F8B9: W1D6= .1=<0B::9FJ0 SH 7981=9: ZB::0= N7ZO 9F> 7ZW 30::5$M&# M TcI %0>" ()))" !*!N+O’ --!,--A
( ())(E!!E)P 收稿) ( ())QE)+E!R 修回) ( 柏敏霜校对)

7981=9: ZB::0= 30::5 9F> 7Z!#! YG e W 30::5 BF W ‘DD1F6:6GBJ9: ;0<" ()))"

40:I0= ! ‘DD1F0 ;05I6F505 $M&#


相关文档

晚期卵巢癌CIK 治疗后外周血T 淋巴细胞亚群和NK细胞的变化及其临床意义
消化系统肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞分析与临床意义
病毒性脑炎患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞变化的临床研究
CIK治疗后肿瘤病人外周血淋巴细胞绝对数值变化的研究
下咽鳞状细胞癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性研究
肝病患者血中T 淋巴细胞亚群及NK 细胞数量的变化
B细胞淋巴瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性的监测
_肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞、T淋巴细胞亚群的变化及意义
布鲁菌病患者外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化_贾宇臣
电脑版